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Article技術(shù)文章
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  • Rel/NF-κB蛋白是一種二聚體、DNA序列特異性轉(zhuǎn)錄因子,在幾乎所有多細(xì)胞生物中協(xié)調(diào)炎癥反應(yīng)、先天免疫和適應(yīng)性免疫以及細(xì)胞分化、增殖和存活。在大多數(shù)細(xì)胞中,NF-κB存在于與IkappaB結(jié)合的非活性復(fù)合物的細(xì)胞質(zhì)中。NF-κB網(wǎng)絡(luò)由五個(gè)家族成員蛋白質(zhì)單體(p65/RelA、RelB、cRel、p50和p52)組成,它們形成同二聚體或異二聚體,差異地結(jié)合DNA,并受兩種途徑的調(diào)控:典型的NF-κB必需調(diào)節(jié)劑(NEMO)依賴(lài)途徑和非特異的NEMO獨(dú)立途徑。NF-κB通路示意...

    2020-06-24
  • 血清的熱滅活是很多培養(yǎng)者感興趣的話(huà)題,價(jià)格不菲的血清中含有諸如生長(zhǎng)因子,維生素,氨基酸等珍貴物質(zhì),而將它們置于50℃以上的溫度長(zhǎng)達(dá)30分鐘是*沒(méi)有必要的。盡管如此,在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室之中血清的熱滅活還是作為常規(guī)來(lái)執(zhí)行,多數(shù)實(shí)驗(yàn)者并沒(méi)有考慮熱處理對(duì)血清中的生長(zhǎng)因子、氨基酸等成分帶來(lái)的負(fù)面影響,下面我們就對(duì)胎牛血清的熱滅活進(jìn)行一些探討和解釋。清熱滅活操作步驟:①選用與血清瓶同規(guī)格的對(duì)照瓶一個(gè)。②對(duì)照瓶?jī)?nèi)放入與血清等體積的水。③溫度預(yù)試。對(duì)照瓶?jī)?nèi)插入2—3支經(jīng)挑選的溫度計(jì)(保證測(cè)試溫度...

    2020-06-22
  • 近日,nature刊登了一篇文章闡述了中性粒細(xì)胞胞外陷阱DNA通過(guò)CCDC25促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移的機(jī)制,小編看到后也是跟大家來(lái)分享下:摘自nature中性粒細(xì)胞胞外陷阱(NETs)是由染色質(zhì)DNA絲狀物和顆粒蛋白包裹而成,由中性粒細(xì)胞釋放,以捕捉微生物體。近的研究表明,在小鼠模型中,NETs的DNA成分(NET-DNA)與腫瘤轉(zhuǎn)移有關(guān)。然而,NET-DNA在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用和臨床意義尚不清楚。文章結(jié)果表明,NETs在乳腺癌和結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移中含量豐富,血清NETs可預(yù)測(cè)早期乳腺癌肝轉(zhuǎn)移...

    2020-06-17
  • 細(xì)胞極性建立、極化的細(xì)胞遷移、胞內(nèi)囊泡運(yùn)輸以及有絲分裂中的染色體分離都需要微管。微管(MTs)是α/β-微管蛋白異二聚體的非平衡聚合物,其中組裝后即在β-微管蛋白處發(fā)生GTP水解。絕大多數(shù)微管從組織中心成核。普遍的微管行為就是動(dòng)態(tài)不穩(wěn)定性,這個(gè)過(guò)程表現(xiàn)為正端緩慢生長(zhǎng),伴隨快速的解聚作用(“災(zāi)難”)并隨之復(fù)蘇。雖然微管的負(fù)端表現(xiàn)出動(dòng)態(tài)不穩(wěn)定性,盡管速率低于正端,負(fù)端通常有限制并固定在MT組織中心,因此通常不會(huì)參與微觀動(dòng)力過(guò)程。在動(dòng)態(tài)不穩(wěn)定和穩(wěn)定的微管間維持平衡,大部分通過(guò)結(jié)合微...

    2020-06-17
  • 蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)(WesternBlot)實(shí)驗(yàn)大家肯定都不陌生,要想做出好看的條帶,從制膠開(kāi)始就不容半點(diǎn)馬虎。WB制膠可謂實(shí)驗(yàn)室新手的必修課了,想想小編我在當(dāng)初實(shí)驗(yàn)室的時(shí)候,就沒(méi)少幫師兄師姐配置WB凝膠,泛黃的配方表小編還記憶猶新。WB凝膠配方表說(shuō)起WB凝膠配置,小編可有一肚子苦水要倒,讓人頭疼的一點(diǎn)就是多種溶液都需要計(jì)算量取,每次調(diào)移液器就要調(diào)半天。還有各種試劑的保存條件也不一樣,配膠之前還需要從冰箱,室溫柜子里分別拿出不同的溶液。這還不算,容易出問(wèn)題的促凝劑APS,需要新...

    2020-06-09
  • 做多了IHC實(shí)驗(yàn)的小伙伴,相信對(duì)于抗原修復(fù)都不陌生,這看似簡(jiǎn)單的一小步,往往會(huì)對(duì)IHC實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生顯著影響。愛(ài)必信作為您身邊的科研百寶箱,秉持著嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真的態(tài)度,為您總結(jié)了一系列從修復(fù)緩沖液、煮沸裝置到修復(fù)方法,注意事項(xiàng)的小技巧,希望這些小細(xì)節(jié)能完善您的實(shí)驗(yàn),像愛(ài)必信一直堅(jiān)信的一樣,從小處入手,時(shí)刻陪伴您的科研生活,助力實(shí)驗(yàn)大成功。抗原修復(fù)是針對(duì)石蠟包埋的切片的必要步驟,大多數(shù)甲醛固定的組織在開(kāi)始染色前都要先修復(fù)抗原,這是由于在固定過(guò)程中產(chǎn)生了亞甲基橋使蛋白之間交聯(lián)屏蔽了抗原位點(diǎn)。...

    2020-05-29
  • 蛋白質(zhì)印跡(WesternBlot),相信大家對(duì)此都不陌生,做為檢測(cè)蛋白表達(dá)及半定量的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)方法,也是很多小伙伴們初入實(shí)驗(yàn)室的入門(mén)課。“上手容易,精通難”可謂對(duì)WB實(shí)驗(yàn)的注釋?zhuān)跞雽?shí)驗(yàn)室的“菜鳥(niǎo)”可以很快上手,做出漂亮的條帶,做過(guò)多年的“大神”也可能一著不慎,實(shí)驗(yàn)“翻車(chē)”,結(jié)果一塌糊涂。有些實(shí)驗(yàn)室甚至流傳著一些所謂的“玄學(xué)”,新手人品好,難做的條帶給新手做等等。真的是這樣么?實(shí)驗(yàn)技術(shù)可不是拼人品,靠運(yùn)氣的事兒,接下來(lái)小編將會(huì)為大家?guī)?lái)WB進(jìn)階技巧系列,干貨滿(mǎn)滿(mǎn),讓大家提升W...

    2020-05-26
  • 蛋白質(zhì)印跡(WB)用于測(cè)量不同條件下特定蛋白的變化。在蛋白質(zhì)印跡(WB)過(guò)程中涉及許多步驟,包括樣品制備、電泳、蛋白轉(zhuǎn)移、抗體孵育和信號(hào)檢測(cè)。為了解釋蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,一個(gè)貫穿全過(guò)程的內(nèi)參是必須的。內(nèi)參可保證每個(gè)泳道中加入了相同量的蛋白樣品,不同泳道上的蛋白以相同的效率從凝膠轉(zhuǎn)到膜上,不同泳道上抗體孵育(對(duì)于一抗而言,必要的話(huà)也包括二抗)、信號(hào)檢測(cè)都是一致的。內(nèi)參的信號(hào)通常用來(lái)對(duì)目標(biāo)蛋白的信號(hào)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。需要強(qiáng)調(diào)的是,對(duì)照蛋白抗體應(yīng)該與實(shí)驗(yàn)抗體在相同的印跡上進(jìn)行。不同的樣...

    2020-05-22
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