細胞在體外能夠成功生長,培養(yǎng)基的選擇及培養(yǎng)方法的優(yōu)化十分關(guān)鍵。細胞在單純的培養(yǎng)基中不能存活,各種類型的細胞培養(yǎng)中必須提供某些生長因子、黏附和伸展因子、微量元素等營養(yǎng)物質(zhì)。傳統(tǒng)培養(yǎng)基中一般會添加動物血清如牛血清等。胎牛血清應取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。其中胎牛血清是品質(zhì)較高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分少。血清培養(yǎng)的優(yōu)勢與局限采用天然來源的血清作為細胞培養(yǎng)添加物,優(yōu)勢在于提供豐富...
生物學科作為實驗學科,嚴謹是很重要的品質(zhì),相信很多小伙伴經(jīng)過長年實驗的熏陶,已經(jīng)形成了一定程度的選擇困難。胎牛血清現(xiàn)在種類眾多,很多人都很難分辨出質(zhì)量的好壞,這就讓人們購買有難度了。畢竟買到劣質(zhì)的胎牛血清會很吃虧,這點必須注意。那么要怎樣分辨胎牛血清質(zhì)量的好壞?拿到血清,先接觸的是血清外觀,對于缺少細胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人來說,外觀的判斷尤為重要1、顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國的細胞培養(yǎng)用血清標準是不高于20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清...
上一期我們?yōu)榇蠹覅R總了ELISA實驗原理、樣本準備和預實驗相關(guān)的十個常見問題及解答,可能有心急的小伙伴早就想要了解更多后續(xù)關(guān)于ELISA實驗方面的問題了,不要走開,接下來將給您帶來相關(guān)解答~Q:invivo實驗周期長,不太好做預實驗,對ELISA結(jié)果會有影響么?怎么辦?A:如果您實驗室之前建立的invivo實驗protocol經(jīng)過驗證,可以保證有效性,那么,可以不用再進行相關(guān)的預實驗;并且,如果實驗周期較長,樣本獲取不易,同時又需要檢測較多指標,建議將樣品分裝凍存,避免反復凍...
脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是所有革蘭陰性細菌外膜的主要組成部分,維持了細菌的結(jié)構(gòu)完整性,并保護細菌膜免受某些化學物質(zhì)的攻擊。LPS被稱為內(nèi)毒素,是革蘭陰性菌主要致病成分,可引起強烈免疫反應,導致幾乎所有的真核細胞發(fā)生形態(tài)、代謝和基因表達變化,刺激宿主細胞因子失控性表達,發(fā)生嚴重感染。敗血癥就是由LPS引發(fā)的重要疾病之一,敗血癥發(fā)作時,患者體內(nèi)LPS濃度將極大提高,以至于身體出現(xiàn)災難性的炎癥反應。大量實驗證實,LPS、LPS結(jié)合蛋白(lipopo-l...
植物血凝素(Phytohaemagglutinin,PHA)是一種發(fā)現(xiàn)于植物特別是豆科植物中的凝集素(lectin),屬于高分子糖蛋白類,是低聚糖(由半乳糖,N-乙酰葡糖胺和甘露糖所構(gòu)成)和蛋白質(zhì)的復合物,具有促進外周血淋巴細胞(PBMC)有絲分裂和誘導干擾素分泌的活性。在生命科學領域,植物血凝素被應用為一種促細胞分裂原(mitogen),在體外能刺激小淋細胞轉(zhuǎn)化成具有免疫活性的淋細胞,并促進其分裂。轉(zhuǎn)化的淋巴細胞能分泌各種淋巴因子。主要應用如下:1、PHA對外周周血淋巴細胞...
白細胞介素4(interleutin-4,IL-4),屬于紅細胞生成素超家族成員,位于活化T細胞,在Th2亞群產(chǎn)生,此外,肥大細胞、IL2刺激小鼠T細胞系2.19、ConA刺激人Th克隆2F1、小鼠胸腺瘤EL-4細胞以及B細胞系CH2均能分泌IL-4,IL4分子量為140kDa,胞膜外區(qū)209氨基酸,跨膜區(qū)24氨基酸,胞漿區(qū)569氨基酸。IL可促使抗原活化的B細胞分裂增殖,但其作用較IL-2稍弱,而IL-4能促使靜止的B細胞表達MHCⅡ類分子、FcεRⅡ/CD23和CD40的...
二抗是在其它宿主體內(nèi)制備的能與一抗或一抗片段結(jié)合的抗體,根據(jù)實驗需求,二抗上通常連有酶或熒光素等標簽。由于二抗所具備的優(yōu)點使得其在免疫學實驗中得以廣泛應用,如WB/ELISA/IHC/IP等。二抗針對某一特定物種的所有抗體均具有特異性,因而使用特定標記的二抗可以免去對每一個一抗進行標記,大大節(jié)省了時間和費用;此外,一個一抗分子可以同時結(jié)合幾個二抗分子,從而使信號大大增強,提高了實驗靈敏度。二抗,廣義上是指專門和一抗進行特異性反應和結(jié)合的抗體。檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體...
【細胞因子】細胞因子是細胞分泌的一種小的信號蛋白,對細胞間的相互作用和通訊有特殊的影響。細胞因子調(diào)節(jié)體液和細胞免疫反應之間的平衡,調(diào)節(jié)特定細胞群的成熟、生長和反應。一些細胞因子以復雜的方式增強或抑制其他細胞因子的作用。細胞因子通過與特定的細胞表面受體結(jié)合并激活下游的細胞內(nèi)信號,從而導致功能或表型的改變。細胞因子主要通過細胞外信號調(diào)節(jié)多種生物功能,包括先天和后天免疫、造血、炎癥和修復以及增殖。細胞因子可能作用于分泌它們的細胞(自分泌作用)、鄰近細胞(旁分泌作用)或在某些情況下作...
電話
微信掃一掃