科研狗起早摸黑做了幾天分子克隆實驗,本想著拖了好幾個星期的實驗終于要做完啦!瞬間覺得自己棒棒噠!但是最后看實驗結(jié)果!!!原地裂開排查實驗試劑,沒問題!排查實驗操作,沒問題!排查儀器,沒問題!那么問題到底出在哪呢?其實問題有可能出現(xiàn)在樣本保存與前處理步驟中哦。生物樣本中的核酸(DNA/RNA)會因為核酸酶、溫度、pH值、微生物、自身化學(xué)性質(zhì)等因素而發(fā)生被動或主動降解,從而導(dǎo)致分子實驗結(jié)果不盡人意。目前針對不同科研的需求,更多的樣本保存方式也相繼問世,小愛為大家匯總了各類樣本保存...
自噬的研究背景關(guān)于自噬的研究曾獲得過兩次諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。是比利時科學(xué)家克里斯汀·德·迪夫(ChristiandeDuve)因發(fā)現(xiàn)了在細胞自噬機制中起到重要作用的溶酶體,獲得1974年諾貝爾獎;其次是日本大隅良典團隊因探明了細胞自噬的啟動機制,獲得2016年諾貝爾獎。2023年,國家自然科學(xué)基金委員會揭曉的今年國自然評審結(jié)果,自噬相關(guān)研究的中標(biāo)數(shù)量超500項(來源:ZCOOL國自然項目查詢系統(tǒng))!圖1自噬研究進程什么是自噬?自噬是細胞在相關(guān)基因(autophagyrela...
FTO(fatmassandobesity-associatedprotein)蛋白是一個m6A修飾去甲基化酶,位于細胞核內(nèi),其主要功能是通過氧化脫甲基酶活性降低m6A水平,F(xiàn)TO針對單鏈RNA中的m6A發(fā)揮去甲基化活性。目前已有各項研究表明m6A修飾參與了潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病機制。2023年9月21日,上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟醫(yī)院洪潔、陳豪燕團隊與附屬瑞金醫(yī)院劉瑞欣團隊在雜志GUT上聯(lián)合發(fā)表題為DisruptionofCerS6-MediatedSphingolipidMe...
概念——Mckay于1997年在《Science》雜志上將神經(jīng)干細胞(neuralstemcells,NSCs)的概念總結(jié)為:具有分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞及少突膠質(zhì)細胞的能力,能自我更新并足以提供大量腦組織細胞的細胞,神經(jīng)干細胞的發(fā)現(xiàn)打破了神經(jīng)細胞不能再生的傳統(tǒng)理論。圖1第3、5、7代神經(jīng)球巢蛋白免疫熒光染色(×400)免疫熒光染色陽性圖片特點——通過對稱分裂和不對稱分裂兩種分裂方式完成自我更新,NSCs具有多向分化潛能,且不表達成熟抗原,不被免疫系統(tǒng)所識別,能通過血腦屏障...
猴痘(Monkeypox,MPX)是由猴痘病毒(Monkeypoxvirus,MPXV)引起的一種病毒性人畜共患病,其屬于正痘類病毒,癥狀表現(xiàn)類似于天花,常見癥狀表現(xiàn)為發(fā)燒(通常在38.5℃到40.5℃之間)、頭痛、肌肉酸痛、淋巴結(jié)腫大及皮疹等[1]。自1970年報告了第一例患者以來,猴痘主要在非洲地區(qū)流行。但2022年5月,猴痘開始了全球范圍的大流行,已有113個國家(地區(qū))報告了89000多例猴痘確診病例,包含152例死亡病例。2023年6月,我國多個省份先后報告多例猴痘...
一、概念:細胞凋亡:由基因控制的細胞自主的有序的死亡,是高度調(diào)控的過程,故又稱為細胞的程序性死亡。二、特征:細胞壞死是病理狀態(tài)下由損傷因子誘導(dǎo)產(chǎn)生的自溶現(xiàn)象,表現(xiàn)為:細胞皺縮變小、質(zhì)膜起泡、染色體凝縮、細胞核碎裂、DNA片段化以及吞噬體最終吞噬細胞。圖1細胞凋亡與細胞壞死過程三、檢測試劑盒1、AnnexinV/PI檢測試劑盒根據(jù)細胞凋亡過程中的變化,可以通過多種途徑對其進行檢測,目前市面上常用的試劑盒包括一下幾種:AnnexinV-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒(abs50...
細胞凍存是細胞培養(yǎng)的重要環(huán)節(jié)之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。細胞凍存技術(shù)要點是慢凍,標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;當(dāng)溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min。我們常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4℃30分鐘----20℃60分鐘----80...
什么是過氧化物酶鏈霉親和素(PeroxidaseStreptavidin,SA-HRP)?鏈霉親和素(Streptavidin,簡稱SA)是從細菌阿維丁鏈霉菌中純化出的一種60kDa的蛋白質(zhì)。鏈霉親和素同源四聚體對生物素(即維生素B7)具有很高的親和力。而過氧化物酶鏈霉親和素就是將過氧化物酶(HorseradishPeroxidase,縮寫為HRP)偶聯(lián)在鏈霉親和素上形成,可與Biotin標(biāo)記的各種親和純化抗體或者Biotin標(biāo)記的色譜級蛋白聯(lián)用進行各種免疫檢測。SA-HRP...
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