愛必信的無血清細(xì)胞凍存液采用*配方用于維持細(xì)胞存活的微環(huán)境，該產(chǎn)品成分明確，無血清無蛋白組分，無需程序降溫，可一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凍存，保護(hù)細(xì)胞免受冰晶和溶質(zhì)損傷，可有效提高細(xì)胞復(fù)蘇活率和活力。適用于干細(xì)胞、免疫細(xì)胞等多種細(xì)胞的冷凍保存。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

成分明確，無血清，無動(dòng)物源組分，安全性高。

即取即用，無需配制。

無需程序降溫，一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凍存。

外觀

無色透明澄清溶液

技術(shù)指標(biāo)

DMSO含量：10%

內(nèi)毒素：< 1 EU/ml

產(chǎn)品用途

用于-80℃、-196℃冷凍保存常用細(xì)胞系，不含蛋白質(zhì)和任何動(dòng)物源成分。

使用方法

準(zhǔn)備細(xì)胞：

1、檢查并確認(rèn)細(xì)胞沒有真菌、細(xì)菌、支原體污染。

2、凍存前的細(xì)胞處于增殖旺盛的對數(shù)生長期 。

3、計(jì)數(shù)待凍存的細(xì)胞數(shù)量。懸浮細(xì)胞應(yīng) 180g 離心 5~10min 后除去培養(yǎng)基，貼壁細(xì)胞應(yīng)消化后計(jì)數(shù)，再 180g 離心除去培養(yǎng)基以獲得細(xì)胞沉淀。

細(xì)胞凍存：

1、首先確定細(xì)胞適宜的凍存密度和體積，計(jì)算應(yīng)使用的本凍存液體積。

注意：可使用的凍存密度為 1~10×106 /ml，推薦凍存密度為 2~5×106 /ml。凍存體積為 0.5~1ml/管。

2、吸取適量凍存液重懸細(xì)胞，使用前產(chǎn)品應(yīng)當(dāng) 2~8℃預(yù)冷。細(xì)胞重懸后應(yīng)當(dāng)立即分裝至細(xì)胞凍存管。

3、經(jīng)凍存液重懸后的細(xì)胞不能在室溫或 2~8℃靜置超過 10 min 以上，應(yīng)當(dāng)盡快將凍存管移入-80℃低溫冰箱，不采取任何程序降溫措施或使用程序降溫裝置。如果無法立即移入-80℃低溫冰箱，至少應(yīng)當(dāng)先移入低于 0℃環(huán)境中（如-20℃冰箱）短暫存放 10 min 左右，同樣不采取程序降溫。

4、-80℃冰箱過夜后的凍存管，若長期儲(chǔ)存，可移入液氮罐中保存。若短期取用，可于-80℃短期保存數(shù)月，保存時(shí)間、效果因細(xì)胞類型而不同。

注意：初次使用本產(chǎn)品凍存的細(xì)胞類型，應(yīng)測試保存時(shí)間和效果后再使用。

細(xì)胞復(fù)蘇：

1、先準(zhǔn)備室溫或 37℃預(yù)溫好的*培養(yǎng)基，其體積為凍存液體積的 9 倍。

2、取出液氮或-80℃中的凍存管，置于 37℃水浴并不斷輕搖。待剩余 1 粒米大小的冰塊時(shí)，迅速移出水浴。

3、立即吸取凍存液至*培養(yǎng)基中，輕柔吹打 3~5 次混勻。然后，180g 離心 5~10 分鐘，獲得細(xì)胞沉淀備用。

4、加入適量新鮮培養(yǎng)基，使用移液管緩慢懸浮細(xì)胞，并將細(xì)胞轉(zhuǎn)染細(xì)胞培養(yǎng)皿/瓶中，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

5、24h 后觀察細(xì)胞狀態(tài)，并更換新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液。

注意事項(xiàng)

1、 使用本產(chǎn)品加入細(xì)胞后，應(yīng)盡量減少室溫存放時(shí)間，并盡快移至-80℃保存。

2、 對于干細(xì)胞（ES細(xì)胞）、原代等細(xì)胞凍存時(shí)，建議使用前，先對所要凍存的細(xì)胞進(jìn)行至少1周以上的試驗(yàn)性凍存培養(yǎng)，確認(rèn)效果后再正式大批量凍存。

3、 本品含有10%DMSO，部分對DMSO敏感的細(xì)胞，建議也許*行預(yù)實(shí)驗(yàn)，確認(rèn)效果后再大量正式使用。

4、 對于沒有保種的新的細(xì)胞類型，使用本品時(shí)建議凍存部分細(xì)胞于含血清的凍存液中，以避免可能的意外情況。

5、 取用凍存液均要在超凈工作臺(tái)內(nèi)無菌操作 。

6、本產(chǎn)品可用于科學(xué)研究，尚未經(jīng)過臨床驗(yàn)證，不可用于 用途。

7、 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

基本信息

中文別名

無血清細(xì)胞凍存液；無血清細(xì)胞保存液

PH值

7.2~7.8

儲(chǔ)存/保存方法

2-8°C保存，有效期24個(gè)月。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖

無血清細(xì)胞凍存液相對傳統(tǒng)凍存液提高了細(xì)胞存活率，復(fù)蘇后活率在90%以上。