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技術講座 | 多重熒光免疫組化在腫瘤免疫治療中的應用

更新時間:2023-06-29      點擊次數:1115

技術原理:

多重熒光免疫組化(mIHC),主要的技術原理來自TSA技術,TSA即酪酰胺信號放大(Tyramide signal amplification)是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術可與高性能染料Alexa Fluor®、傳統熒光染料和比色檢測系統相兼容。


TSA主要原理是利用酪胺 Tyramide 的過氧化物酶反應(酪胺鹽在HRP催化H2O2下形成共價鍵結合位點),產生大量的酶促產物,該產物能與周圍的蛋白殘基(包括色氨酸、組氨酸和酪氨酸殘基)結合,這樣在抗原-抗體結合部位就有大量的生物素沉積,與隨后加入的 Streptavidin—HRP/熒光基團結合,經幾次這樣的循環放大,可以結合大量的酶分子or熒光基團,結果使其檢測信號得到幾何級放大。

TSA多重熒光免疫組化染色示意圖


簡單來說,用這種方法做多重熒光染色是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯熒光素),來催化后續添加入體系的非活性熒光素。該熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯,使得蛋白樣品與熒光素穩定結合。然后進行微波處理,前一輪非共價結合的抗體被洗掉,共價結合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復始。等到所有抗體孵育結束,熒光素都結合好后,最后去檢測結果。


講座主題:

多重熒光免疫組化在腫瘤免疫治療中的應用


講座時間:

6月29日(本周四)下午15:00-16:00


講座內容:

1、多重熒光免疫組化技術簡介;

2、多重熒光免疫組化在腫瘤靶向治療中的應用;

3、文獻案例解析;

4、Absin多重熒光免疫組化解決方案。


報名方式:

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