技術原理：

多重熒光免疫組化（mIHC），主要的技術原理來自TSA技術，TSA即酪酰胺信號放大（Tyramide signal amplification）是一類利用辣根過氧化酶（HRP）對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術可與高性能染料Alexa Fluor®、傳統熒光染料和比色檢測系統相兼容。

TSA主要原理是利用酪胺 Tyramide 的過氧化物酶反應（酪胺鹽在HRP催化H2O2下形成共價鍵結合位點），產生大量的酶促產物，該產物能與周圍的蛋白殘基（包括色氨酸、組氨酸和酪氨酸殘基）結合，這樣在抗原-抗體結合部位就有大量的生物素沉積，與隨后加入的 Streptavidin—HRP/熒光基團結合，經幾次這樣的循環放大，可以結合大量的酶分子or熒光基團，結果使其檢測信號得到幾何級放大。

TSA多重熒光免疫組化染色示意圖

簡單來說，用這種方法做多重熒光染色是利用二抗上帶有的HRP（而不是直接偶聯熒光素），來催化后續添加入體系的非活性熒光素。該熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化，跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯，使得蛋白樣品與熒光素穩定結合。然后進行微波處理，前一輪非共價結合的抗體被洗掉，共價結合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育，周而復始。等到所有抗體孵育結束，熒光素都結合好后，最后去檢測結果。

講座主題：

多重熒光免疫組化在腫瘤免疫治療中的應用

講座時間：

6月29日（本周四）下午15:00-16:00

講座內容：

1、多重熒光免疫組化技術簡介；

2、多重熒光免疫組化在腫瘤靶向治療中的應用；

3、文獻案例解析；

4、Absin多重熒光免疫組化解決方案。

報名方式：

詳見微信公眾號“愛必信生物"