抗體/蛋白標(biāo)記技術(shù)是一種利用特定標(biāo)記物(如熒光染料、酶、金屬離子等)對抗體或蛋白進(jìn)行標(biāo)記的方法,以便于通過各種檢測手段追蹤、定位和定量分析目標(biāo)分子。這種技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)研究、臨床診斷和藥物開發(fā)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。
生物素(biotin)和親和素(avidin)系統(tǒng)是一種具有親和力的生物分子識別系統(tǒng),兩者的親和常數(shù)比抗原-抗體至少高1萬倍,是目前已知強(qiáng)度最高的非共價作用。生物素標(biāo)記的蛋白可用于蛋白質(zhì)相互作用研究,蛋白純化等,標(biāo)記的抗體可以用于WB、IF、Elisa等。
Avi標(biāo)簽蛋白生物素標(biāo)記
Avi標(biāo)簽是由15個氨基酸殘基組成的短肽標(biāo)簽(GLNDIFEAQKIEWHE),其中含有一個可生物素化的賴氨酸殘基,生物素連接酶(BirA)能夠特異性識別Avi標(biāo)簽,并在ATP存在的條件下,將生物素共價連接到Avi標(biāo)簽的賴氨酸殘基上。在ATP存在的情況下,生物素連接酶(BirA)首先將生物素活化,形成生物素酰-5’腺苷酸,活化的生物素隨后被連接到Avi標(biāo)簽中的賴氨酸殘基上,完成生物素標(biāo)記,此方法高度特異,只作用于Avi標(biāo)簽序列,不會標(biāo)記其他蛋白質(zhì)或氨基酸殘基,且反應(yīng)條件:溫和,對蛋白質(zhì)活性影響小。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs9748 | Biotin Labeling for Avitag Protein Kit | 200ug/1mg |
產(chǎn)品特點(diǎn):
結(jié)果展示:
化學(xué)標(biāo)記法,是將蛋白N-末端游離胺基及內(nèi)部的賴氨酸側(cè)鏈上的胺基與生物素分子結(jié)合,通常一個蛋白質(zhì)分子會被標(biāo)記上多個生物素分子。化學(xué)標(biāo)記法具有靈敏度高、tag free等特點(diǎn),是常用的生物學(xué)方法之一。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 特點(diǎn) |
abs45153386 | Biotin Microscale Protein Labeling Kit | 1kit | 一次偶聯(lián)反應(yīng)可標(biāo)記多達(dá) 200 ug 蛋白 低至半小時完成整個反應(yīng) |
abs90063 | 生物素(Biotin)標(biāo)記試劑盒 | 1次、2次、3次 | 既可標(biāo)記抗體,也能標(biāo)記蛋白 已優(yōu)化抗體標(biāo)記的最適生物素標(biāo)記比例 每個反應(yīng)最多可標(biāo)記1mg抗體 1h左右完成標(biāo)記 |
高碘酸鈉(NaIO?)能夠氧化糖蛋白中的糖鏈,將糖鏈中的二羥基氧化成醛基。這些醛基可以與抗體上的氨基發(fā)生反應(yīng),形成席夫堿(Schiff base)。隨后,通過(NaBH?)還原反應(yīng),席夫堿被轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的仲胺鍵,從而實(shí)現(xiàn)HRP與抗體的共價結(jié)合。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | HRP量 | 可標(biāo)記抗體量 | 推薦抗體標(biāo)記濃度 |
abs50102 | HRP快速偶聯(lián)試劑盒 | 100ug | 100ug | 67ug-100ug | 3~6mg/mL |
300ug | 300ug | 201ug-300ug | |||
500ug | 500ug | 333ug-500ug |
FITC分子中的異硫氰酸酯基團(tuán)是活性基團(tuán),能夠與蛋白質(zhì)中的氨基發(fā)生反應(yīng),將FITC溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲校ㄈ缍谆鶃嗧浚珼MSO),然后加入到蛋白質(zhì)溶液中。FITC的異硫氰酸酯基團(tuán)與蛋白質(zhì)中的氨基發(fā)生反應(yīng),形成硫代氨基甲酰鍵(-NH-CO-NH-),從而將FITC共價連接到蛋白質(zhì)上。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs90007 | 快速FITC 抗體(蛋白)標(biāo)記試劑盒 | 3T |
產(chǎn)品特點(diǎn):
1、操作簡單,約一小時完成蛋白標(biāo)記和純化
2、優(yōu)化的F/P值,每T可標(biāo)記約1mg蛋白
3、無需稱量微量粉末; 試劑盒包含一次性試劑瓶
4、包括純化樹脂和離心柱,確保快速有效地去除未反應(yīng)的染料并擁有優(yōu)異的蛋白質(zhì)回收率。
A549-GAPDH細(xì)胞爬片免疫熒光鏡檢,abs90007標(biāo)記的FITC-IgG(goat anti-rabbit)熒光二抗
Absin可以提供多種常見熒光素FITC/AF300/AF488/AF594/AF555/CY3/CY5/CY7以及HRP或者生物素的標(biāo)記,體系成熟,目前常規(guī)染料標(biāo)記周期1-2周。詳情可點(diǎn)擊Biotin/FITC/HRP抗體標(biāo)記服務(wù)_愛必信(absin)
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