ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒常見問題
更新時(shí)間:2019-10-30 點(diǎn)擊次數(shù):2509
愛必信熱賣單品ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒,靈敏度更高,背景更低,穩(wěn)定性更好。常備現(xiàn)貨, 小編整理了ECL 的常見問題,助您的實(shí)驗(yàn)更順利! 問題 | 原因 | 方法 | 白色條帶黑色背景 | 體系中HRP過量 | 進(jìn)一步稀釋HRP 標(biāo)記 | 膜上有棕色或黃色條帶 | 背景發(fā)亮 | 信號弱或無信號 | HRP過量,消耗底物 | 進(jìn)一步稀釋HRP 標(biāo)記 | 抗原或抗體不足 | 增加抗體 | 使用超級ECL | 轉(zhuǎn)膜失敗 | 優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件 | HRP 活性低 | 測試HRP 活性:暗室中,將1ul未稀釋的HRP 放入裝有1-2ml的基質(zhì)工作 溶液的試管中。 幾分鐘內(nèi),溶液會(huì)立即發(fā)出藍(lán)光。 | 高背景 | HRP過量,消耗底物 | 進(jìn)一步稀釋HRP 標(biāo)記 | 封閉不充分或使用了不適當(dāng)?shù)姆忾]試劑 | 優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件 | 洗滌不充分 | 增加洗滌時(shí)間和次數(shù) | 膜過度曝光 | 減少曝光時(shí)間 | 抗原、抗體 過量 | 減少抗體上樣量 | 抗體特異性差 | 優(yōu)化抗體特異性 | 條帶有斑點(diǎn) | 轉(zhuǎn)膜失敗 | 優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件 | x射線膠片與膜之間有氣泡 | 去除所有氣泡后,再曝光到膠片上 | 背景有斑點(diǎn) | 形成聚合體 | 使用前通過0.2um過濾器過濾hrp -偶聯(lián)物 | 電泳轉(zhuǎn)移過程中溫度過高 | 控制電泳和轉(zhuǎn)移過程中的溫度 | 非特異性條帶 | HRP-偶聯(lián)物過量 | 進(jìn)一步稀釋hrp -偶聯(lián)物 | SDS導(dǎo)致非特異性蛋白結(jié)合 | 在免疫檢測過程中不要使用SDS | 抗體特異性差 | 優(yōu)化抗體特異性 |
愛必信特色產(chǎn)品線(全部現(xiàn)貨): 二抗、標(biāo)簽抗體、對照抗體;WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;細(xì)胞因子、信號通路調(diào)節(jié)劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒、呼吸爆發(fā)試劑盒;動(dòng)植物提取物,定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白)...  愛必信(上海)生物科技有限公司 公眾平臺:愛必信生物 |